Un tren especial que va desde la Antártida hasta la selva puede dejar de existir, y el motivo se debe al deterioro de las vías del tren. Los animales, temerosos de perder el único medio de transporte que les permite viajar, acudieron a Diego en busca de ayuda en Go Diego Go! El rescate ferroviario de Diego. El niño está listo para ayudar, involucrándote en la implementación de su plan. Se trata de reparar la carretera, pero primero hay que poner a todos los animales en los vagones. Los pasajeros aceptan viajar únicamente en compañía de los de su propia especie, por lo que hay un vagón separado para pingüinos, ciervos, osos, etc. Cuando todos los animales hayan sido colocados, el tren comenzará su recorrido y antes de cada parada deberás armar el camino como un rompecabezas girando secciones individuales en Go Diego Go! El rescate ferroviario de Diego.
